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  • 菌种保藏中心(常用的菌种保藏方法有哪些)

    首页 > 信息 > 文章正文 发布时间: 2022-09-20 02:31 阅读()

    菌种保存的方法有斜面低温保藏法、液体石蜡覆盖保藏法、沙土保藏法、滤纸保藏法、甘油管保存法、冷冻干燥保存法。1、斜面低温保藏法:将菌种接种到适合的固体斜面培养基上,用油纸将棉塞部分包扎好,然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。2、液体石蜡覆盖保藏法:使用液体石蜡将斜面菌覆盖住,使其和空气隔绝。


    一、菌种保存的方法有哪些

    1、斜面低温保藏法

    (1)将菌种接种到适合的固体斜面培养基上,等到菌种充分生长过后,使用油纸将棉塞部分包扎好,然后转移至2-8℃的冰箱中进行保存。

    (2)如果是霉菌、放线菌及有芽孢的细菌,一般可以保存2-4个月左右,需要移种一次。如果是酵母菌,一般可以保存2个月左右,需要每个月移种一次。

    2、液体石蜡覆盖保藏法

    (1)将液体石蜡装在三角烧瓶中,并使用棉塞塞好,用牛皮纸进行包扎,然后在0.1MPa,121.3℃的环境下灭菌30分钟左右,接着将其放置在40℃的温箱之中,将水汽蒸发掉。

    (2)将需要保藏的菌种,用适合的斜面培养基进行培养,得到健壮的孢子或者是菌体。

    (3)使用灭菌过的吸管将液体石蜡吸出,注入斜面上,用量为高出斜面顶端1cm左右为宜。

    (4)将试管直立,放置在低温或者是室温之下进行保存。

    (5)霉菌、放线菌、芽孢细菌可以保藏2年以上不死,酵母菌可以保藏1-2年,一般无芽孢细菌可以保藏1年,脑膜炎球菌可以保藏3个月左右(37℃环境下)。

    3、沙土保藏法

    (1)准备好河沙,加入10%稀盐酸,然后加热煮沸30分钟左右,将里面的有机质去掉,然后将酸水倒掉,用自来冲洗至ph为中性,接着烘干,过筛(40目筛子),去掉粗颗粒。

    (2)准备好非耕作层的不含腐植质的瘦黄土或红土,浸泡洗涤数次,直至ph为中性,然后烘干,碾碎,过筛(100目筛子),去掉粗颗粒。

    (3)将沙和土按照2:1的比例混合,装入试管或者是安瓿管中,塞好棉塞,在1212℃的环境下灭菌30分钟左右。

    (4)将菌种在斜面培养基中培养,得到健壮的菌体,然后向斜面培养物中注入3-5ml无菌水,洗下细胞或孢子制成菌悬液。

    (5)使用灭菌过的吸管吸取菌悬液,然后均匀滴入沙土管中(0.2-0.5ml/管)。如果是放线菌或霉菌,可以直接挑取孢子拌入沙土管中。

    (6)真空抽去沙土管中的水分。

    (7)将沙土管用火焰熔封,然后存放在低温(4-6℃)干燥处保藏,或者是将沙土管用牛皮纸或塑料纸包好,放置在干燥器内保存。

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